วิธีอ่านใบรับรองการวิเคราะห์
ความหมายของแต่ละฟิลด์บนใบรับรอง COA ของเปปไทด์ ตัวเลขความบริสุทธิ์จาก HPLC วัดอะไรจริงๆ สิ่งที่ใบรับรองไม่สามารถบอกใครได้ และวิธีตรวจสอบใบรับรองอย่างอิสระ
ใบรับรองการวิเคราะห์เป็นเอกสารเดียวที่คั่นกลางระหว่างผู้ซื้อกับข้อกล่าวอ้างเกี่ยวกับสิ่งที่อยู่ในขวด ผู้จำหน่ายเกือบทุกรายในตลาดนี้เผยแพร่เอกสารดังกล่าว และเกือบไม่มีรายใดอธิบายวิธีอ่านมัน ซึ่งทำให้เอกสารนั้นง่ายต่อการผลิตและยากต่อการตรวจสอบ
คู่มือนี้ครอบคลุมความหมายของแต่ละฟิลด์ สิ่งที่ตัวเลขความบริสุทธิ์วัดและไม่ได้วัด ข้อจำกัดของเอกสารเอง และวิธียืนยันใบรับรองกับห้องปฏิบัติการที่ออกให้แทนที่จะเชื่อภาพจากผู้จำหน่ายโดยปราศจากการตรวจสอบ
ฟิลด์ต่างๆ บนรายงานจริง
ใบรับรองระบุแบตช์เฉพาะที่ถูกทดสอบในวันที่เฉพาะโดยห้องปฏิบัติการที่มีชื่อ องค์ประกอบทุกอย่างเหล่านั้นมีความสำคัญ และใบรับรองที่ขาดองค์ประกอบใดๆ เหล่านั้นกำลังอธิบายสิ่งที่ไม่เฉพาะเจาะจง
หมายเลขแบตช์หรือล็อต
เชื่อมโยงใบรับรองกับการสังเคราะห์หนึ่งรอบ ใบรับรองที่ไม่มีหมายเลขแบตช์ไม่สามารถจับคู่กับขวดในมือได้ ซึ่งทำให้มันเป็นเพียงของตกแต่ง
วันที่ทดสอบ
กำหนดเวลาที่วัสดุถูกวิเคราะห์ ตัวเลขความบริสุทธิ์อธิบายวัสดุในวันที่ถูกทดสอบ ไม่ใช่ไปข้างหน้าอย่างไม่มีกำหนด
ชื่อห้องปฏิบัติการ
หน่วยงานที่ทำการวัดจริง การทดสอบภายในไม่ใช่การทดสอบโดยบุคคลที่สาม และรายงานที่ไม่ระบุชื่อห้องปฏิบัติการคือการทดสอบภายในในชื่ออื่น
หมายเลขงานหรือรายงาน
การอ้างอิงของห้องปฏิบัติการเองสำหรับการวิเคราะห์ นี่คือสิ่งที่ทำให้การตรวจสอบอิสระเป็นไปได้ เพราะมันคือกุญแจที่ห้องปฏิบัติการสามารถค้นหาได้
ตัวเลขความบริสุทธิ์
โดยปกติเป็นเปอร์เซ็นต์จาก HPLC สิ่งที่มันวัดแคบกว่าที่ดูเหมือน — ดูส่วนถัดไป
การยืนยันเอกลักษณ์
โดยปกติคือ mass spectrometry รายงานน้ำหนักโมเลกุลที่สังเกตเทียบกับค่าทางทฤษฎีสำหรับลำดับ สิ่งนี้ตอบว่าโมเลกุลที่ถูกต้องมีอยู่หรือไม่ ซึ่งเป็นคำถามที่แตกต่างจากว่ามีมันอยู่เท่าไหร่
ตัวเลขความบริสุทธิ์จาก HPLC วัดอะไร
High-performance liquid chromatography แยกส่วนประกอบของตัวอย่างและตรวจจับมันเมื่อละลายออกมา สร้างร่องรอยของพีค ความบริสุทธิ์ถูกคำนวณเป็นพื้นที่ของพีกเป้าหมายเป็นเปอร์เซ็นต์ของพื้นที่พีกทั้งหมดที่ตรวจพบ โดยปกติใช้การตรวจจับด้วยแสงอัลตราไวโอเลตในบริเวณที่พันธะเปปไทด์ดูดกลืน
คำจำกัดความนั้นมีผลที่ตามมาซึ่งผู้จำหน่ายส่วนใหญ่ไม่ได้ระบุไว้: ตัวเลขนั้นเป็นสัดส่วนของสิ่งที่เครื่องตรวจจับเห็น ไม่ใช่สัดส่วนของมวลของขวด สิ่งใดก็ตามที่เครื่องตรวจจับไม่ตอบสนองจะไม่อยู่ในตัวหาร
เปปไทด์ที่ผ่านการแช่แข็งแห้งไม่ใช่เปปไทด์บริสุทธิ์ตามน้ำหนัก มันมีน้ำตกค้างและไอออนตรงข้ามที่เหลือจากการทำให้บริสุทธิ์ โดยทั่วไปคือ trifluoroacetate หรือ acetate ขวดสามารถบริสุทธิ์ 99% ตามพื้นที่โครมาโทกราฟีและยังคงมีเปปไทด์น้อยกว่าตามมวลอย่างมีนัยสำคัญกว่าที่ตัวเลขบนฉลากแสดงไว้ การวัดที่แก้ปัญหานี้คือปริมาณเปปไทด์สุทธิ โดยทั่วไปโดย amino acid analysis หรือการวัดไนโตรเจน และมันปรากฏบนใบรับรองน้อยกว่าตัวเลข HPLC มาก
ความบริสุทธิ์เป็นค่าสัมพัทธ์ ไม่ใช่สัมบูรณ์
มันเปรียบเทียบพีกเป้าหมายกับพีกอื่นๆ ที่ตรวจพบ มันไม่ใช่ข้อความเกี่ยวกับปริมาณผงที่เป็นเปปไทด์
ความยาวคลื่นการตรวจจับมีความสำคัญ
สิ่งเจือปนที่ดูดกลืนอย่างอ่อนที่ความยาวคลื่นที่เลือกมีส่วนร่วมในพื้นที่พีกน้อย ดังนั้นมันจึงลดตัวเลขความบริสุทธิ์น้อยกว่าปริมาณจริงที่จะแนะนำ
น้ำหนักรวมไม่ใช่เปปไทด์สุทธิ
ไอออนตรงข้ามและน้ำตกค้างเป็นส่วนหนึ่งของผงและไม่ใช่เปปไทด์ ใบรับรองที่รายงานเฉพาะความบริสุทธิ์ทางโครมาโทกราฟีไม่ได้พูดถึงส่วนนั้น
เงื่อนไขวิธีการควรอยู่บนรายงาน
คอลัมน์ การไล่ระดับสี และความยาวคลื่นกำหนดสิ่งที่การรันสามารถแยกแยะได้ เปอร์เซ็นต์เปล่าที่ไม่มีวิธีการเป็นการยืนยันมากกว่าการวัด
สิ่งที่ใบรับรองไม่สามารถบอกใครได้
สิ่งที่เป็นประโยชน์ที่สุดที่ควรเข้าใจเกี่ยวกับ COA คือขอบเขตของข้อกล่าวอ้างของมัน มันรายงานสิ่งที่ห้องปฏิบัติการหนึ่งวัดบนตัวอย่างหนึ่งในวันหนึ่ง หลายสิ่งที่ผู้คนมักอ่านในใบรับรองอยู่นอกขอบเขตนั้นเพียงแค่นั้น
ว่าแบตช์ที่ทดสอบเป็นแบตช์ที่ได้รับหรือไม่
ใบรับรองอธิบายแบตช์ที่มันระบุชื่อ การจับคู่หมายเลขแบตช์บนใบรับรองกับแบตช์บนขวดเป็นขั้นตอนของผู้ซื้อ ไม่ใช่ของห้องปฏิบัติการ
ความปลอดเชื้อและเอนโดท็อกซิน
HPLC และ mass spectrometry เป็นการวิเคราะห์ทางเคมี ไม่มีการตรวจจับการปนเปื้อนของจุลินทรีย์หรือเอนโดท็อกซินของแบคทีเรีย ซึ่งต้องการการทดสอบแยกต่างหากที่ใบรับรองเปปไทด์ส่วนใหญ่ไม่รวมอยู่ด้วย
ความคงตัวหลังการทดสอบ
ใบรับรองเป็นภาพรวม มันไม่ได้พูดถึงวิธีการจัดเก็บหรือจัดการวัสดุระหว่างวันที่ทดสอบและการส่งมอบ
อะไรก็ตามเกี่ยวกับผลกระทบของสารประกอบ
ใบรับรองเป็นเอกสารเอกลักษณ์และความบริสุทธิ์ มันไม่มีข้อมูลใดๆ เกี่ยวกับกิจกรรมทางชีวภาพ ความปลอดภัย หรือว่างานวิจัยที่เผยแพร่สนับสนุนการใช้งานใดๆ เฉพาะเจาะจงหรือไม่
เจ็ดสิ่งที่ควรทำให้มองอีกครั้ง
ไม่มีข้อใดต่อไปนี้พิสูจน์ว่าใบรับรองถูกปลอมแปลง แต่ละข้อทำให้มันไม่สามารถตรวจสอบได้ ซึ่งเพื่อวัตถุประสงค์ในทางปฏิบัติเป็นปัญหาที่คล้ายกัน
- 01
ไม่มีการระบุชื่อห้องปฏิบัติการ
รายงานที่ไม่ระบุว่าใครทำการวิเคราะห์ไม่สามารถตรวจสอบกับใครได้
- 02
ไม่มีหมายเลขแบตช์ หรือหมายเลขแบตช์ที่ไม่ตรงกับขวด
ใบรับรองจะอธิบายวัสดุบางอย่าง แต่ไม่ใช่วัสดุในมืออย่างชัดเจน
- 03
ไม่มีวันที่ทดสอบ
การวัดที่ไม่มีวันที่ไม่สามารถวางได้เทียบกับการสังเคราะห์หรือการจัดส่ง
- 04
ใบรับรองหนึ่งใบถูกนำกลับมาใช้กับผลิตภัณฑ์หลายรายการ
การสังเคราะห์แต่ละรอบเป็นแบตช์แยกกัน ใบรับรองเดียวที่ครอบคลุมแค็ตตาล็อกทั้งหมดกำลังอธิบายอย่างมากหนึ่งในนั้น
- 05
ความบริสุทธิ์ที่ระบุถึงความแม่นยำที่ไม่น่าเชื่อ
ตัวเลขเช่น 99.98% บ่งบอกถึงความละเอียดที่การรวมโครมาโทกราฟีตามปกติไม่ส่งมอบ รายงานโดยปกติมีหนึ่งหรือสองตำแหน่งทศนิยมเป็นอย่างมาก
- 06
ภาพที่ไม่มีเส้นทางการตรวจสอบ
ภาพของรายงานง่ายต่อการแก้ไข รายงานที่สามารถค้นหาได้ที่ห้องปฏิบัติการที่ออกให้ไม่ใช่
- 07
การทดสอบที่อธิบายว่าเป็นภายใน
การทดสอบตนเองอาจซื่อสัตย์และมีความสามารถ แต่มันไม่เป็นอิสระ และไม่ควรนำเสนอเป็นการตรวจสอบโดยบุคคลที่สาม
การตรวจสอบใบรับรองอย่างอิสระ
ประเด็นของหมายเลขรายงานคือมันสามารถตรวจสอบกับห้องปฏิบัติการที่ออกให้ได้ โดยไม่ต้องผ่านผู้จำหน่าย ห้องปฏิบัติการวิเคราะห์ที่ให้บริการตลาดนี้โดยทั่วไปดำเนินการค้นหาที่หมายเลขรายงานหรืองานส่งคืนบันทึกต้นฉบับ
แบตช์ทุกชุดที่เราจัดส่งมีใบรับรองในกล่อง และรายงานบนเว็บไซต์นี้ถูกเผยแพร่พร้อมกับชื่อห้องปฏิบัติการที่ออกให้ควบคู่ไปกับแบตช์และ ในกรณีที่ห้องปฏิบัติการให้ไว้ การอ้างอิงการตรวจสอบของมัน การวิเคราะห์ของเราดำเนินการโดย Janoshik Analytical และ Brown Institute of Biomolecular Research
ขั้นตอนที่สำคัญคือขั้นตอนที่ผู้จำหน่ายไม่สามารถทำแทนผู้ซื้อได้: นำตัวระบุจากใบรับรองไปที่ห้องปฏิบัติการแทนที่จะยอมรับสำเนาของผู้จำหน่าย
- 01
จับคู่แบตช์บนขวดกับแบตช์บนใบรับรอง
หากมันแตกต่างกัน ใบรับรองกำลังอธิบายวัสดุที่แตกต่างกัน ไม่ว่ามันจะพูดอะไรก็ตาม
- 02
ยืนยันว่าห้องปฏิบัติการเป็นบุคคลที่สาม
ค้นหาชื่อห้องปฏิบัติการด้วยตัวเองแทนการใช้ลิงก์ที่ผู้ขายจัดหาให้
- 03
ตรวจสอบรายงานจากแหล่งที่มา
ใช้หมายเลขงานหรือหมายเลขรายงานที่ช่องทางยืนยันของห้องปฏิบัติการเองในกรณีที่มี
- 04
อ่านว่าวัดอะไรจริง ๆ
ตรวจสอบว่ารายงานครอบคลุมทั้งเอกลักษณ์และความบริสุทธิ์หรือไม่ และระบุเงื่อนไขโครมาโทกราฟีหรือไม่
คำถามที่พบบ่อย
- เปอร์เซ็นต์ความบริสุทธิ์ที่สูงกว่าหมายความว่าผลิตภัณฑ์ดีกว่าเสมอหรือไม่?
ไม่จำเป็น เพราะตัวเลขนั้นเป็นสัดส่วนของพื้นที่พีคที่ตรวจพบแทนที่จะเป็นสัดส่วนของมมวลในขวด ใบรับรองสองฉบับที่รายงานเปอร์เซ็นต์เดียวกันสามารถอธิบายผงที่มีปริมาณเปปไทด์สุทธิต่างกันได้ ขึ้นอยู่กับน้ำตกค้างและเคาน์เตอร์ไอออน ตัวเลขความบริสุทธิ์ให้ข้อมูลมากที่สุดเมื่อรายงานระบุเงื่อนไขโครมาโทกราฟีที่ใช้ผลิตตัวเลขนั้นด้วย
- ความแตกต่างระหว่างความบริสุทธิ์ HPLC กับปริมาณเปปไทด์สุทธิคืออะไร?
ความบริสุทธิ์ HPLC เปรียบเทียบพีคเป้าหมายกับพื้นที่พีครวมที่ตรวจพบและอธิบายว่าสารประกอบที่ตั้งใจไว้คิดเป็นเท่าไหร่ของสิ่งที่ตรวจพบ ปริมาณเปปไทด์สุทธิอธิบายว่าเปปไทด์คิดเป็นเศษส่วนใดของมวลผง โดยส่วนที่เหลือเป็นเคาน์เตอร์ไอออนและน้ำตกค้าง ทั้งสองตอบคำถามคนละเรื่อง และใบรับรองที่รายงานเฉพาะข้อแรกไม่ได้บอกอะไรเกี่ยวกับข้อหลัง
- ใบรับรองการวิเคราะห์สามารถยืนยันว่าขวดปลอดเชื้อได้หรือไม่?
ไม่ได้ HPLC และแมสสเปกโทรเมทรีเป็นการวิเคราะห์ทางเคมีที่ระบุและวัดปริมาณสารประกอบ ทั้งสองไม่ตรวจจับการปนเปื้อนจุลินทรีย์หรือเอนโดท็อกซินของแบคทีเรีย ซึ่งทั้งสองต้องการการทดสอบทางจุลชีววิทยาแยกต่างหากที่ใบรับรองเปปไทด์โดยปกติไม่รวมไว้
- ทำไมใบรับรองบางฉบับรายงานน้ำหนักโมเลกุลที่แตกต่างเล็กน้อยจากค่าทฤษฎี?
แมสสเปกโทรเมทรีรายงานมวลที่สังเกตได้ซึ่งนำมาเปรียบเทียบกับค่าที่คำนวณจากลำดับ ความแตกต่างเล็กน้อยเกิดจากความแม่นยำของมวลของเครื่องมือและจากการรายงานพีคไอโซโทปใด มวลที่อยู่ภายในค่าเผื่อที่ระบุของวิธีนั้นสอดคล้องกับโมเลกุลที่ถูกต้อง มวลที่แตกต่างอย่างมากไม่สอดคล้อง
- การทดสอบภายในเหมือนกับการทดสอบโดยบุคคลที่สามหรือไม่?
ไม่เหมือน การทดสอบโดยบุคคลที่สามหมายความว่าการวิเคราะห์ดำเนินการโดยห้องปฏิบัติการที่เป็นอิสระจากผู้ขาย และรายงานระบุชื่อห้องปฏิบัติการนั้น การทดสอบภายในอาจมีความสามารถและรายงานอย่างซื่อสัตย์ แต่ฝ่ายที่อ้างและฝ่ายที่ตรวจสอบเป็นฝ่ายเดียวกัน จึงไม่ได้ให้การยืนยันที่เป็นอิสระ
- หมายเลขรายงานหรือหมายเลขงานในใบรับรองทำอะไร?
เป็นหมายเลขอ้างอิงของห้องปฏิบัติการผู้ออกสำหรับการวิเคราะห์นั้น และเป็นสิ่งที่ทำให้การยืนยันอิสระเป็นไปได้ ในกรณีที่ห้องปฏิบัติการมีระบบค้นหา หมายเลขนั้นจะคืนค่าบันทึกต้นฉบับโดยตรงจากห้องปฏิบัติการแทนที่จะจากสำเนาของผู้ขาย