如何阅读分析证书。
肽类COA上每个字段的含义、HPLC纯度数字实际测量什么、证书无法告知任何人什么，以及如何独立验证证书。
分析证书是买家与关于瓶中物质声明之间唯一的文件。这个市场中几乎每个供应商都会发布一份，但几乎没有人解释如何阅读它——这使得该文件易于制作却难以核查。
本指南涵盖每个字段的含义、纯度数字测量和未测量的内容、文件本身的局限性，以及如何向出具证书的实验室确认证书，而不是相信供应商的图片。
真实报告上的字段
分析证书标识由指定实验室在特定日期测试的特定批次。这些元素中的每一个都很重要，缺少其中任何一个的证书并未描述任何特定内容。
批号或批次号
将证书与一次合成运行关联。没有批号的证书无法与手头的瓶子匹配，这使其成为装饰性的。
测试日期
确定材料分析的时间。纯度数字描述的是测试当天的材料，而非之后无限期的状态。
实验室名称
实际进行测量的一方。内部测试不是第三方测试，未命名实验室的报告是换个名称的内部测试。
任务或报告ID
实验室对该分析的自有参考编号。这使得独立验证成为可能，因为它是实验室可以查找的关键信息。
纯度数字
通常是来自HPLC的百分比。它测量的内容比看起来的要窄——见下一节。
身份确认
通常是质谱分析，报告观察到的分子量与序列的理论值对比。这回答了正确的分子是否存在，这与存在多少是不同的问题。
HPLC纯度数字测量什么
高效液相色谱法分离样品的组分并在它们洗脱时检测，产生峰的轨迹。纯度计算为目标峰面积占检测到的总峰面积的百分比，通常使用肽键吸收区域的紫外检测。
该定义带来了大多数供应商未说明的后果：该数字是检测器看到的内容的比例，而非瓶子质量的比例。检测器未响应的任何物质都不在分母中。
冻干肽按重量计不是纯肽。它携带残留水分和纯化后留下的反离子，通常是三氟乙酸盐或乙酸盐。一个瓶子可以按色谱面积计达到99%纯度，但按质量计仍含有明显少于标签数字所暗示的肽。解决这一问题的测量是净肽含量，通常通过氨基酸分析或氮测定进行，它出现在证书上的频率远低于HPLC数字。
纯度是相对的，非绝对的
它将目标峰与其他检测到的峰进行比较。它不是关于粉末中有多少是肽的陈述。
检测波长很重要
在所选波长处弱吸收的杂质贡献的峰面积很小，因此它们降低纯度数字的程度低于其实际数量所暗示的。
总重量不是净肽
反离子和残留水分是粉末的一部分，但不是肽。仅报告色谱纯度的证书对该部分不作任何说明。
方法条件应属于报告
色谱柱、梯度和波长决定了运行可以分辨什么。没有方法的单纯百分比是断言而非测量。
证书无法告知任何人什么
关于COA要理解的最有用的事情是其声明的边界。它报告一个实验室在某一日期对一个样品测量的内容。人们通常从证书中读取的几件事完全超出了该范围。
测试批次是否是收到的批次
证书描述它命名的批次。将证书上的批号与瓶子上的批号匹配是买家的步骤，而非实验室的。
无菌性和内毒素
HPLC和质谱是化学分析。两者都不检测微生物污染或细菌内毒素，这需要大多数肽类证书不包含的单独测试。
测试后的稳定性
证书是快照。它对测试日期与交付之间材料的储存或处理方式不作任何说明。
关于化合物效果的任何内容
证书是身份和纯度文件。它不携带任何关于生物活性、安全性或已发表研究是否支持任何特定用途的信息。
应促使再次审视的七件事
以下内容都不能证明证书是伪造的。它们中的每一个都使其无法验证，就实际目的而言，这是一个类似的问题。
- 01
未命名实验室
未标识谁执行分析的报告无法与任何人核实。
- 02
没有批号，或批号与瓶子不符
那么证书描述的是某些材料，但不能证明是手头的材料。
- 03
没有测试日期
未注明日期的测量无法相对于合成或装运进行定位。
- 04
一份证书在多个产品中重复使用
每次合成运行都是单独的批次。涵盖整个目录的单一证书最多描述其中一个。
- 05
纯度引用到不可信的精度
如99.98%的数字暗示了常规色谱积分无法提供的分辨率。报告通常最多携带一位或两位小数。
- 06
没有验证途径的图像
报告的图片易于更改。可以在出具实验室查找的报告则不然。
- 07
测试描述为内部
自我测试可能是诚实和有能力的,但它不是独立的,也不应被呈现为第三方验证。
独立验证证书
报告ID的意义在于可以向出具它的实验室核实,而无需通过供应商。为该市场服务的分析实验室通常提供查询功能,报告或任务编号可返回原始记录。
我们装运的每个批次在盒中都附有其证书,本网站上的报告与批次一起发布时命名了出具实验室,并在实验室提供验证参考编号的情况下一并提供。我们的分析由Janoshik Analytical和Brown Institute of Biomolecular Research执行。
重要的步骤是供应商无法为买家完成的:将证书上的标识符带到实验室,而非接受供应商的副本。
- 01
将瓶子上的批次与证书上的批次匹配
如果它们不同,无论证书说什么,它都在描述不同的材料。
- 02
确认实验室是第三方
独立查找具名实验室，而非通过销售方提供的链接。
- 03
从源头查找报告
在实验室自有的验证途径中使用任务或报告标识符进行查询（如有）。
- 04
阅读实际测量的内容
检查报告是否同时涵盖了鉴定和纯度，以及是否说明了色谱条件。
常见问题。
- 更高的纯度百分比是否总意味着更好的产品？
不一定，因为该数值是检测到的峰面积比例，而非瓶中质量的比例。两份报告相同百分比的证书可能描述了净肽含量不同的粉末，这取决于残留水分和反离子。当报告同时说明了用于产生该数值的色谱条件时，纯度数值最具参考价值。
- HPLC纯度与净肽含量之间有什么区别？
HPLC纯度将目标峰与检测到的总峰面积进行比较，描述了检测到的物质中有多少是目标化合物。净肽含量描述了粉末质量中肽的比例，其余部分为反离子和残留水分。它们回答的是不同的问题，仅报告前者的证书对后者不做任何说明。
- 分析证书能否确认瓶子无菌？
不能。HPLC和质谱是鉴定和定量化合物的化学分析。两者均不检测微生物污染或细菌内毒素，这两者需要单独的微生物学检测，而肽类证书通常不包含此类检测。
- 为什么有些证书报告的分子量与理论值略有不同？
质谱报告的是观测到的质量，与根据序列计算出的值进行比较。微小差异源于仪器的质量准确度以及报告的是哪个同位素峰。在方法规定容差范围内的结果与正确分子一致；显著不同的质量则不一致。
- 内部检测与第三方检测是否相同？
不同。第三方检测意味着分析由独立于销售方的实验室执行，报告中会列出该实验室名称。内部检测可能是专业且诚实报告的，但做出声明的一方和检查的一方是同一方，因此无法提供独立确认。
- 证书上的报告或任务标识符有什么作用？
它是出具实验室对该分析的自有参考编号，使独立确认成为可能。如实验室提供查询功能，该标识符可直接从实验室而非供应商的副本中返回原始记录。