Contenido de agua Karl Fischer
Un método de titulación que mide el agua remanente en un polvo liofilizado — una de las razones por las que la masa bruta del polvo sobrestima el péptido que un vial realmente contiene.
La titulación Karl Fischer es el método analítico estándar para medir el contenido de agua en una muestra sólida o líquida. Se basa en una reacción química que consume agua estequiométricamente, por lo que la cantidad de reactivo utilizada se traduce directamente en la cantidad de agua presente. Para péptidos liofilizados responde una pregunta específica: cuánta de la masa del polvo es humedad residual en lugar de compuesto.
La liofilización elimina la mayor parte del agua pero nunca toda. Un pequeño porcentaje de humedad residual es típico, ligada lo suficientemente fuerte para sobrevivir la liofilización, y varía entre lotes y con el almacenamiento. Esa agua contribuye al peso bruto del polvo sin contribuir nada al contenido de péptido, lo cual es una de las dos razones persistentes — siendo el contraión la otra — por las que la masa de etiqueta y la masa de péptido difieren.
El contenido de agua aparece en los certificados de péptidos con menos frecuencia que la pureza y la identidad, generalmente cuando se encargó una caracterización más completa. Donde se reporta, permite conciliar el contenido neto de péptido con la masa bruta; donde no se reporta, la fracción de humedad permanece como una parte no medida de la diferencia.
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